C11 BODIPY 581/591实验说明
C11 BODIPY 581/591化学结构与性能分析
C11 BODIPY 581/591是一种BODIPY（氟硼荧）衍生物，一种脂质过氧化的荧光探针，其结构为BODIPY的α不对称取代，一端为丁二烯苯基，与母体形成一个大共轭结构，使此侧的原子处于同一个平面；另一端为C11(十一酸)。独特的化学结构让C11 BODIPY 581/591具有良好的光稳定性、荧光伪影很低、并能轻松进入细胞膜。在细胞膜内，C11 BODIPY 581/591的丁二烯部位与ROS(活性氧)发生氧化还原反应，其充当还原剂作用，发射波长由591nm(还原型)红移至510nm（氧化型），激发波长分别为581nm(还原型)、500nm(氧化型)。无论是氧化型，还是还原型，其主体骨架保持不变，均具有良好的亲脂性，均不会自发离开细胞膜磷脂双分子层，还原态和氧化态处在磷脂双分子层的两个不同区域，离双分子层中心距离为18?和<7.5?的位置。
C11 BODIPY 581/591 还原态和氧化态发射波光谱能很好分开，具有高量子产量，低浓度标记即可，对氧自由基、过氧亚硝酸盐比较敏感，对超氧化物、NO、铁离子、H2O2不敏感。常用于评价活细胞内脂质过氧化和抗氧化性能的研究。
C11 BODIPY 581/591作为脂质过氧化荧光探针，检测铁死亡
C11 BODIPY 581/591也可用于测定铁死亡（Ferroptosis ），铁死亡是一种铁依赖性的，区别于细胞凋亡、细胞坏死、细胞自噬的新型的细胞程序性死亡方式。铁死亡的主要机制是，在二价铁或酯氧合酶的作用下，催化细胞膜上高表达的不饱和脂肪酸，发生脂质过氧化，从而诱导细胞死亡；此外，还表现为抗氧化体系（谷胱甘肽系统）的调控核心酶GPX4的降低。在铁死亡过程中，我们通常认为二价铁与H2O2发生芬顿反应（Fenton reaction），生成了羟基自由基·OH，羟基自由基具有极强的氧化能力，C11 BODIPY 581/591检测铁死亡，主要在细胞膜内与自由基发生反应。
化学信息
货号：ajci64572
CAS：217075-36-0
分子式：C30H34BF2N2O2 ? H
分子量：504.4
纯度：＞99%
存储：Store at -20°C
溶解：30mg/ml in DMSO
| 包装（需要更多包装请咨询） | 价格（￥） | 纯度 | 库存 | 购买 |
| 200ug | 350 | ＞99% | 现货 | 点击此处购买 |
| 1mg | 1200 | ＞99% | 现货 |
实验步骤（来自文献，仅供参考）
1.将1mg的C11 BODIPY 581/591样品（货号：ajci64572）溶于198.2554 uL DMSO中，制备10mM存储液。
2.培养合适密度的目标细胞，适当处理以建立相关细胞模型（如可利用某些小分子药物处理），然后加入适当C11 BODIPY 581/591，使得最终浓度为5 um，孵育1小时。（注：该探针比较灵敏，使用较低浓度就能检测到，大部分参考文献使用2 um-10 um）
一.流式检测法：
为了去除多余的染料，用PBS洗涤细胞两次以上，之后用胰酶消化，重悬在含5% FBS的PBS中，用流式细胞仪，在488nm-565nm激光器激发，在FL1通道测量505nm-550nm对应的信号，在FL2通道测量580nm以上的信号。当C11 BODIPY 581/591的不饱和丁二烯部分在细胞膜内与活性氧（ROS）发生氧化还原反应，导致其最大发射荧光从591nm红移至510左右，并且与脂质活性氧的产生成正比。[1]
一.共聚焦荧光显微镜检测法：
同样需要用PBS洗涤细胞两次以上，利用共聚焦荧光显微镜，分别用488nm-565nm激光器激发，收集相关荧光信号图像，根据测定的荧光信号算数平均值±SEM，用以量化分析脂质过氧化细胞。[2] 未氧化的C11 BODIPY 581/591呈现红色，氧化的呈绿色。
参考文献：
[1] Ferroptosis is an autophagic cell death process. Cell Res. 2016 Sep;26(9):10 21-32.
[2] Alpha synuclein aggregation drives ferroptosis: an interplay of iron, calcium and lipid peroxidation. Cell Death Differ. 2020 Apr 27.
恭喜以下科学家使用我司C11 BODIPY 581/591发表SCI论文：
1.Advanced Healthcare Materials.doi:10.1002/adhm.202202150 （IF:11.0，Q1）
2.Journal of Controlled Release.doi:10.1016/j.jconrel.2023.01.035 （IF:11.467，Q1）
3.Neoplasma Vol.69, No.3, p.648–656, 2022.doi:10.4149/neo_2022_211103N1568
4.Research Square(2022).doi:10.21203/rs.3.rs-2381256/v1
5.CNS Neuroscience & Therapeutics.22 February 2023.doi:10.1111/cns.14159
6.Journal of Colloid And Interface Science.645 (2023) 882–894.doi:10.1016/j.jcis.2023.05.003
7.Nano letters.April 10, 2023.doi:10.1021/acs.nanolett.3c00365
