DPPH自由基清除原理及实验
基本信息
DPPH是一种稳定的自由基清除剂，其稳定性得益于三个苯环的共轭性和多硝基的吸电子性，独特的化学结构让处于氮原子中心的不成对电子既稳定，又能接受一个电子或者氢离子。DPPH也可以渗透细胞，常用于评价细胞，组织提取物的抗氧化性能研究。
货号：ajci23192
化学名：1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl
溶解：DMSO : 25 mg/mL (63.40 mM; Need ultrasonic)；Ethanol : 1 mg/mL (2.54 mM; Need ultrasonic)
CAS：1898-66-4
分子式：C18H12N5O6
分子量：394.3
纯度：＞98%
存储：Store at -20°C
库存：现货
| 包装（需要更多包装请咨询） | 价格（￥） | 纯度 | 库存 | 购买 |
|---|---|---|---|---|
| 500mg | 280 | ＞99% | 现货 | |
| 1g | 400 | ＞99% | 现货 | |
| 5g | 950 | ＞99% | 现货 | |
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DPPH自由基清除原理
DPPH外观呈深紫色，在溶液中亦是如此，当一个体系中具有自由基时，在加入DPPH后，自由基可以被DPPH的不成对电子捕获，反应后颜色从深紫色变成浅黄色或无色，具有识别简单，检测容易，价格便宜等优点，用简单的分光光度计检测即可。在517nm波长处有最大吸收峰，吸光度与其浓度呈线性关系，如果需要量化反应掉的DPPH，可以事先配制一定浓度梯度的DPPH溶液，绘制吸收光度曲线，用以确定溶液中剩余的含量。反应原理如下图：
测定样品清除DPPH自由基能力的实验
DPPH自由基清除率计算公式：清除率(%)=[1-(Ai-Aj)Ac]×100。自由基清除实验：以2mL的0.2mM的DPPH为工作液为例，其中Ac为2mL 95%乙醇加2 mL DPPH工作液的吸光值；Ai为2 mL不同浓度的待测样品加入2 mL DPPH，混匀后于室温下避光反应30 min，在517 nm波长处测定吸光值；Aj为对照，值为2 mL对应浓度的测定样品的溶液加上2 mL无水乙醇测得的吸光值。实验中分别测得各吸光度，计算即可求得测定样品对DPPH自由基的清除率。实验之前可以用一定梯度用量的DPPH分别预测试2 mL样品，以颜色变化为指标，确定DPPH的最少用量，实验中选择的DPPH用量应略大于最小用量。
为了更好地评价样品的抗氧化性，同样也可以测定样品清除ABTS自由基的能力，用以综合评估。需要注意的是这里的ABTS自由基通常是用ABTS（货号：ajce51120）溶液与过硫酸钾混合反应制备的，部分文献以7.0 mmol/L ABTS溶液和2.45 mmol/L过硫酸钾溶液，1:1混合，避光反应12小时以上。在734 nm处有最大吸收峰，待测样品加入自由基溶液中反应时，734 nm处吸光度会降低，降低的值代表被清除掉的自由基的量所造成吸光度降低的值。
