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Golgi-Tracker Red 高尔基体荧光探针染色实验说明


Golgi-Tracker Red基本信息

Golgi-Tracker Red作为一种高尔基体红色荧光探针,为神经鞘脂(sphingolipid)类荧光探针之一,也属于Bodipy染料家族成员中的一种,其最大激发/发射波长为598nm/617nm,已经广泛应用于活细胞高尔基体特异红色标记。


货号:;ajcx12176
别名:BODIPY TR Ceramide;Golgi-Tracker Red;Bodipy 598/617
分子式:C39H50BF2N3O4S
分子量:705.71
纯度:>98%
溶解度:Soluble in DMSO
储存:Store at -20°C, protect from light


我司提供的Golgi-Tracker Red包装及价格
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实验原理

Golgi Tracker Red是采用BODIPY TR荧光标记的C5-ceramide,由于Ceramide或其类似物可以选择性地和高尔基体结合,因此本产品可以用作高尔基体特异性的红色荧光探针。Golgi Tracker Red能适用于活细胞的高尔基体荧光标记,但不能用于固定细胞的标记,结构式如下

Golgi Tracker Red结构示意图

Golgi Tracker Red 高尔基体染色步骤

  1. 1.本产品以高浓度溶液提供(1mg ,33.3mg/ml, 47.23,mM,30μl),使用时可以考虑先稀释成储备液浓度(如0.5mM),分成多管冻存,以备下次使用,由于体积微少,使用时务必低速离心后再取用。一般工作液浓度为5uM,不同样本可能对浓度要求有些差异。

  2. 2.取少量储备液(0.5mM)按照一点比例稀释,按1∶100的比例稀释,并在使用前在37°C下孵育溶液。将30μl高尔基体样品沉积在处理过的APTES载玻片表面上30分钟后,用PBS广泛洗涤表面2~3次以除去未吸附的高尔基体膜。将50μl Golgi-Tracker Red溶液滴入APTES载玻片上,在黑暗条件下将高尔基体样品附着30分钟。用PBS广泛洗涤载玻片表面2~3次后,高尔基体样品在PBS缓冲液中用Nikon EclipseTi系列显微镜成像。(PLoS One. 2013; 8(4): e61596.doi: 10.1371/journal.pone.0061596)
    Golgi Tracker Red 高尔基体染色成像示意图
    (A) Fluorescent image of Golgi membrane fractions (red) labeled with Golgi-tracker Red. The Golgi stack (in blue box) and the Golgi vesicles or single Golgi cisternae (in green box) are imaged. Scale bar is 5 μm. (B) Control experiment. The Golgi-tracker Red was dropped onto the APTES-slide following the washing step by PBS buffer. There is no obvious signal observed. The scale bar is 5 μm.

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以上为高尔基红色荧光探针,除此之外我司还有高尔基体绿色荧光探针(BODIPY FL C5-Ceramide;Cat No.:ajci76450),两者使用没什么本质区别,可以按照实验需要选择不同颜色。


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