Paclitaxel是一种天然抗肿瘤药，可稳定微管蛋白 (tubulin) 的聚合。Paclitaxel 可导致有丝分裂停滞和诱导细胞凋亡 (apoptosis)，抑制细胞有丝分裂，最终导致细胞死亡。Paclitaxel 还可诱导细胞自噬 (autophagy)。

货号：ajci9264

中文名字：紫杉醇

溶解：≥ 42.6955mg/mL in DMSO, ≥ 31.6 mg/mL in EtOH with ultrasonic    

CAS：33069-62-4

分子式：C47H51NO14
分子量：853.91
纯度：＞99%
存储：Store at -20°C

原理：

Paclitaxel是新型抗微管药物，通过促进微管蛋白聚合抑制解聚，保持微管蛋白稳定，抑制细胞有丝分裂。体外实验证明紫杉醇具有显著的放射增敏作用，可能是使细胞中止于对放疗敏感的G2和M期。在人内皮细胞中IC50为0.1 pM。Paclitaxel在104到 105倍更高浓度时，抑制非内皮性人类细胞，IC50 为1 nM -10 nM。Paclitaxel选择性抑制细胞增殖，具有种属特异性，在Paclitaxel极低浓度时，小鼠内皮细胞对 Paclitaxel不敏感。 极低浓度Paclitaxel抑制 人类内皮细胞，但是不影响细胞微管结构，且处理的细胞在 G2/M 期没有出现细胞周期停滞和凋亡，说明这是一种新型尚未查明的作用机制。在体外血管生成实验中，在三维纤维蛋白基质中，极低浓度Paclitaxel阻断人类内皮细胞形成芽管。在SMF存在时, Paclitaxel 作用于 K562 细胞的有效浓度从50 ng/ml降低到 10 ng/ml。在有或无SMF时，Paclitaxel 使K562 细胞周期停滞与DNA损伤相关。Paclitaxel单独处理四种细胞系，包括A549 细胞,H358, H1395 细胞和H1666 细胞，抑制CDK1，这种作用存在时间依赖性。

体外研究：Paclitaxel 在 10⁴到 10⁵倍更高浓度时，抑制非内皮性人类细胞，IC50 为1nM -10nM。Paclitaxel 选择性抑制细胞增殖，具有种属特异性，在Paclitaxel极低浓度时，小鼠内皮细胞对Paclitaxel不敏感。极低浓度Paclitaxel抑制人类内皮细胞，但是不影响细胞微管结构，且处理的细胞在G2/M期没有出现细胞周期停滞和凋亡，说明这是一种新型尚未查明的作用机制。在体外血管生成实验中，在三维纤维蛋白基质中，极低浓度 Paclitaxel阻断人类内皮细胞形成芽管。在SMF存在时, Paclitaxel作用于K562细胞的有效浓度从50ng/ml降低 到10ng/ml。在有或无SMF时，Paclitaxel使K562细胞周期停滞与DNA损伤相关。Paclitaxel单独处理四种细胞系，包括A549细胞,H358, H1395 细胞和 H1666 细胞，抑制 CDK1，这种作用存在时间依赖性。

体内研究：Paclitaxel 单独处理 BC-V 和 BC-ER 肿瘤的抑制定额分别为 49.78 和 51.23%。20 mg/kg Paclitaxel 处理 6 个周期，显著降低 Ki-67 阳性细胞百分比,BC-V 肿瘤中降到 20.4%，BC-ER 肿瘤中降到 25.1%。

实验（来自文献，仅供参考）：

一：CCMC 组装纳米胶束紫杉醇药物释放载体 ：以 N-胆甾醇琥珀酰基-O-羧甲基壳聚糖(CCMC,胆甾醇基取代度 6.9%)为原料，在水溶液中制备其自组装凝胶纳 米胶束，采用稳态荧光探针法考察临界胶束浓度。 取一定量 CCMC 分散于去离子水中，在 37°C,50 r/min 条件下振荡 48h,然后进行探头超声处理 3min(输出功 率 100W，间歇脉冲方式，脉冲宽度 2.0S，间歇时间 2.0S)，重复操作至获得均一分散液，经滤膜(0.45 um) 过滤除去杂质，即得 CCMC 自组装纳米胶束。在超声条件下向空白胶束溶液中缓慢滴加紫杉醇甲醇溶液，置于 透析袋内，于去离子水中透析处理 8h,除去甲醇，即得负载紫杉醇的 CCMC 自组装纳米胶束。空白和载药 CCMC 自组装纳米胶束的粒径及分布用动态光发射法（LLS,氩离子激光器）在 25°C，波长 532nm,动态光散射角为 90 度的条件下检测。

二：紫杉醇磁性脂质体制备：采用薄膜超声法制备紫杉醇磁性脂质体。卵磷脂(187mg);胆固醇(39mg)；紫杉醇(10MG)容于 5mL 无水乙醇 溶剂中，得到脂质体溶液，在 55°C 水浴条件下旋转蒸发制成均匀薄膜，继续 55°C 水浴减压蒸发 30min 出去 无水乙醇，得到稠厚的胶状物。加入谷氨酸修饰的磁性三氧化二铁纳米颗粒(nano-Fe2O3-Glu)磁流体2.15ml(13.70g/L)及 5%葡萄糖溶液 2.85mL,手摇振荡使器壁上的凝胶脱落，超声处理 20min,得到紫杉醇磁性 脂质体混悬液。

三：负载紫杉醇的 PEG/PCL 共聚物纳米粒制备：紫杉醇聚合物纳米粒(PMT) PEG/PCL 两亲性三嵌段共聚物(PEG-b-PCL-b-PEG)，简称 PECL， PECL 制备：在 100ML 四口烧瓶中加入 10 克 PCL，加热溶解，40°C 加入物质的量为 A 的两倍的物料 TDI（甲 苯二异氰酸酯）；升温至 80°C 反应 3h,然后加入与剩余异氰酸基等物质的量或者稍过量的物料 C，继续反应 3h 左右。粗产物溶于氯仿，然后加入过量溶剂沉析，离心分离或者减压抽滤得到 PECL 两亲性三嵌段共聚物。 PMT 制备：采用自乳化法溶剂蒸发制备 PMT，把紫杉醇和 PECL 溶于有机溶剂中，在磁力搅拌下缓慢滴加到双 蒸水中，直到溶剂挥发完，胶束内核固化成球，离心分离，冷冻干燥即得 PMT。

四：常用紫杉醇助溶剂的选择：聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)和无水乙醇（1:1）常用于紫杉醇增溶剂。

五：紫杉醇细胞实验操作

Cell lines: 细胞：包括人类新生儿皮肤微血管内皮细胞(HMVECs), 人脐静脉内皮细胞(HUVECs), 人脐动脉内 皮细胞 (HUAVECs), 正常人类星形胶质细胞(NHAs), 正常人体皮肤成纤维细胞(NHDFs), 正常人表皮角质形 成细胞(NHEKs), 人类乳腺上皮细胞(HMEpCs), 人前列腺上皮细胞(PrEpCs) 和人脐动脉平滑肌细胞 (UASMCs)；

Concentrations: 0.1 pM-100 pM； Incubation Time: 72 小时；

Method:培养细胞，包括人类新生儿皮肤微血管内皮细胞(HMVECs), 人脐静脉内皮细胞(HUVECs), 人脐动脉 内皮细胞 (HUAVECs), 正常人类星形胶质细胞(NHAs), 正常人体皮肤成纤维细胞(NHDFs), 正常人表皮角质 形成细胞(NHEKs), 人类乳腺上皮细胞(HMEpCs), 人前列腺上皮细胞(PrEpCs) 和人脐动脉平滑肌细胞 (UASMCs)。在 96 孔板中使用 6 和 12 通道的细胞进行增殖。细胞按每孔 3000–5000 个细胞接种，然后粘附 4 小时。Paclitaxel 在培养基中稀释，然后按一式四份加到孔中，细胞温育 3 天，然后加入 MTS 试剂，然后定 量测量每孔中的活细胞。

参考文献：

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[7]. Yilmaz E, et al. Sensory neuron subpopulation-specific dysregulation of intracellular calcium in a rat model of chemotherapy-induced peripheral neuropathy. Neuroscience. 2015 Aug 6;300:210-8.
[8]. Jing C, et al. Lenvatinib enhances the antitumor effects of paclitaxel in anaplastic thyroid cancer. Am J Cancer Res. 2017 Apr 1;7(4):903-912.