MQAE

A fluorescent chloride indicator dye

此产品仅用于科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务

库存: 现货

可选规格

包装

价格

促销价

数量
50mg

￥537.00

430.00

- +
100mg

￥862.00

690.00

- +
200mg

￥1400.00

1120.00

- +
500mg

￥3012.00

2410.00

- +

已选 0 种 0 瓶

金额: ￥0.00

首页收藏

Background

1-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium (bromide) is a fluorescent indicator dye that can be used to measure intracellular and extracellular chloride concentrations (absorption/emission max: 350/460 nm).¹ It detects the ion via diffusion-limited collisional quenching.

1.Sabnis, R.W.Handbook of biological dyes and stains: Synthesis and industrial applications(2010)

Protocol

本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。

1、?制备MQAE染色液：

（1）配置染料储存液：将MQAE溶于乙腈和水的混合物（1：1），配置成500 mM的母液，使用0.22μm滤膜过滤除菌。储存液分装后在-20 °C避光保存。

（2）使用Krebs-hepes缓冲液稀释储备液，获得浓度为5-10 mM的MQAE 工作溶液。

Krebs-hepes缓冲液：20 mM HEPES、128 mM NaCl、2.5 mM KCl、2.7 mM CaCl2、1 mM MgCl2、16 mM 葡萄糖，pH 7.4

注意：请根据实际情况调整?MQAE 工作液浓度，现用现配。

2、细胞悬浮染色(以6 孔板为例)

（1）悬浮细胞经1000g离心3-5min。弃去上清液，使用Krebs-hepes缓冲液清洗两次，每次5分钟。

（2）贴壁细胞使用Krebs-hepes缓冲液清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min。

（3）加入1mL染料工作液重悬细胞，室温避光孵育30-60min分钟，不同细胞最佳培养时间不同。

（4）孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。

（5）使用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞，通过显微镜进行观察。

3、细胞贴壁染色

（1）在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。

（2）从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。

（3）从盖玻片的一角加入100μL染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞，室温避光孵育30-60min分钟。

（4）吸弃染料工作液，使用PBS清洗盖玻片2~3次，每次5分钟。

4、显微镜检测：使用光学显微镜或流式细胞仪对染色细胞进行检测，MQAE的最大激发光/发射光为350/460 nm。

注意事项：

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

参考文献:

[1].?Chenchen Ma,et. Colloidal Particles in Tuna Head Soup: Chemical Localization, Structural Change, and Antioxidant Property. 2021 Mar 29:8:638390. doi: 10.3389/fnut.2021.638390. eCollection 2021.

[2]. Yukiko Ikeuchi,et. Measurement of [Cl-]i unaffected by the cell volume change using MQAE-based two-photon microscopy in airway ciliary cells of mice. 2018 Mar;68(2):191-199. doi: 10.1007/s12576-018-0591-y. Epub 2018 Jan 13.